安培檢測(cè)器是在中科院研究生院應(yīng)化所袁倬斌教授主持下,匯聚電分析化學(xué)、分離科學(xué)、電子工程、物理、自動(dòng)化控制和機(jī)械加工等方面的專(zhuān)家及技術(shù)人員,歷時(shí)三年多研制而成,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)藥科學(xué)、分子生物學(xué)、環(huán)境科學(xué)及單細(xì)胞、單分子分析等領(lǐng)域。
工作原理
當(dāng)被分離的電活性物質(zhì)流經(jīng)電極表面時(shí),由于溶液與電極間有電勢(shì)差,電活性物質(zhì)就要得到或失去電子,被還原或氧化,因此,溶液和電極間發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移,形成電流,該電流符合法拉第定律。記錄電流隨時(shí)間的變化,得到電泳譜圖。
檢測(cè)模式
安培檢測(cè)器最常用的檢測(cè)模式有離柱檢測(cè)和柱端檢測(cè)兩種。在離柱檢測(cè)模式中,分離和檢測(cè)毛細(xì)管間用導(dǎo)線連接消除安培檢測(cè)系統(tǒng)的分離電壓。在端柱檢測(cè)模式中,用一個(gè)微盤(pán)電極正對(duì)放置于分離毛細(xì)管出樣口處,而沒(méi)有任何連接。
安培檢測(cè)器有許多優(yōu)點(diǎn):
①靈敏度高。盡管僅有1%-10%被測(cè)定的電活性物質(zhì)得到轉(zhuǎn)化,但最小檢測(cè)限可達(dá)10^(-9)-10^(-12),且對(duì)各類(lèi)電活性物質(zhì)靈敏度差別很小。例如,兒茶酚胺的最低檢測(cè)濃度小于100pmol/L。溶解氧和電極穩(wěn)定性的問(wèn)題造成發(fā)生還原反應(yīng)的被測(cè)物質(zhì)的靈敏度較氧化反應(yīng)低一個(gè)數(shù)量級(jí)。
②選擇性高。一般只對(duì)電活性物質(zhì)有響應(yīng),適用于電活性物質(zhì)的痕量測(cè)定,而不受非電活性物質(zhì)的干擾。而且由于每種物質(zhì)的氧化還原反應(yīng)電位不同,對(duì)于具有不同電極電位的物質(zhì),只要在電解池的兩極間施加不同的電壓,就可控制電極反應(yīng),提高選擇性。在目前重要的分析領(lǐng)域,如生物、醫(yī)學(xué)、環(huán)境等,可測(cè)量復(fù)雜基體及大量非電活性物質(zhì)中的痕量活性物質(zhì),例如在生物體液和組織勻漿液中的數(shù)千種無(wú)關(guān)組分中,只對(duì)幾種物質(zhì)進(jìn)行選擇性檢測(cè)。
?、劬€性范圍寬。一般是! " # 個(gè)數(shù)量級(jí),有的可達(dá)$ 個(gè)數(shù)量級(jí)。
?、芙Y(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。不需要紫外% 可見(jiàn)光檢測(cè)器的光學(xué)元件,造價(jià)和使用成本都很低。
⑤檢測(cè)池體積小,柱外效應(yīng)較小,噪聲低,響應(yīng)速度快。
安培檢測(cè)器的測(cè)量原理本身也決定了它固有的局限性與不足。
第一,電化學(xué)檢測(cè)器所使用的流動(dòng)相必須具有導(dǎo)電性。安培檢測(cè)器采用的流動(dòng)相中必須有常用濃度范圍為0.01mol/L-0.1mol/L 的電解質(zhì)(如含鹽的緩沖液)存在。流動(dòng)相要有足夠高的介電常數(shù),使電解質(zhì)充分解離。流動(dòng)相在電極表面呈電化學(xué)惰性,工作電壓下背景電流小。常用的反相液相色譜的極性溶劑或水溶液流動(dòng)相和離子色譜的水溶液流動(dòng)相大多適用于安培檢測(cè)器。
第二,安培檢測(cè)器對(duì)流動(dòng)相的流速、溫度、pH值等因素的變化比較敏感。
第三,測(cè)量還原電流時(shí),流動(dòng)相中痕量的氧也可能發(fā)生電解反應(yīng),引起干擾。
第四,由于電極表面可能會(huì)發(fā)生吸附、催化氧化還原等現(xiàn)象,因此都有一定的壽命。目前還沒(méi)有一種通用和可靠的方法能使電極表面完全再生,需要經(jīng)常清洗或更換。
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