Gd-DOTA-hTERT ASON磁共振腫瘤端粒酶靶向顯像實驗研究

摘要： 背景與目的:研究表明,約有超過85%的惡性腫瘤高表達端粒酶活性。因此,端粒酶已成為腫瘤診斷和治療研究領(lǐng)域的熱點之一。目前,以放射性核素標(biāo)記人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶反義寡核苷酸(human telomerase reverse transcriptase antisense oligonucleotide,hTERT ASON)對高表達hTERT的惡性腫瘤進行靶向顯像在國內(nèi)外也有相關(guān)報道,但核醫(yī)學(xué)圖像在解剖和空間分辨率上存在著不足,難以獲得高質(zhì)量的圖像。因此,本研究擬以磁共振成像方法對活體內(nèi)腫瘤端粒酶的進行檢測,并對其進行可行性評價。方法:以DOTA(1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-N,N',N'',N'''-tetraacetic acid)為螯合劑對全鏈硫代修飾的hTERT ASON(3’末端連接一個伯氨)進行Gd3+標(biāo)記制備反義探針并進行體外實驗,以99mTc標(biāo)記的DOTA-hTERT ASON生物分布實驗;建立人黑色素瘤A375裸鼠模型,分別于腹腔注射前及注射后0.5、1、2、4、6、24 h在7.0T Magnetic Resonance Imaging(MRI)下行T1WI顯像,以腫瘤及其周圍正常組織作為感興趣區(qū)(region of interest,ROI)計算信噪比(signal to noise ratio,SNR)并與Gd-DTPA進行比較;顯像后48 h處死小鼠,以免疫組織化學(xué)方法檢測腫瘤組織端粒酶活性。結(jié)果:Gd-DOTA-hTERT ASON的標(biāo)記率約為65%,在37℃新鮮人血清中溫育24 h后,探針的降解率低于3%;A375細胞對探針的攝取約為8.5%,Gd-DOTA-hTERT ASON轉(zhuǎn)染的A375細胞信號強度明顯高于Gd-DTPA和DOTA-hTERT ASON組;腫瘤在注射反義探針和Gd-DTPA均表現(xiàn)為明顯強化,反義探針組SNR最高可達2.37,最大強化時間為注射后2~6 h,且可被DOTA-hTERT ASON所抑制(P<0.05),而Gd-DTPA組強化時間為注射后2 h;Gd-DOTA-hTERT ASON可抑制腫瘤端粒酶活性。結(jié)論:Gd-DOTA-hTERT ASON顯示了良好的腫瘤靶向性,對端粒酶陽性表達的腫瘤具有潛在的定性診斷價值。 （共8頁）