蕺菜rDNA ITS序列分析的正交試驗(yàn)條件的初步研究

摘要： 以蕺菜DNA為模板,采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),對(duì)影響蕺菜rDNA ITS區(qū)擴(kuò)增的重要參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化試驗(yàn),以期建立蕺菜rDNA ITS擴(kuò)增反應(yīng)的優(yōu)化體系。結(jié)果表明,最優(yōu)蕺菜ITS-PCR的反應(yīng)體系為25μl反應(yīng)體系中含Taq酶0.75 U、Mg~(2+)+(1 mmol/L)1.0μl、dNTP(0.15 mmol/L)1.5μl、引物對(duì)(0.6μmol/L)1.2μl、模板DNA(10 ng/μl)2.0μl、10×buffer(不含Mg~(2+))2.5μl。這一體系的建立為利用蕺菜rDNA ITS區(qū)研究蕺菜種質(zhì)資源的系統(tǒng)進(jìn)化提供了標(biāo)準(zhǔn)化程序。 （共5頁(yè)）