樟子松SSR反應(yīng)體系優(yōu)化

摘要： 從模板DNA、Taq酶含量、dNTP濃度、引物濃度、退火溫度、循環(huán)次數(shù)6個(gè)方面,分別設(shè)置單因素多水平試驗(yàn),觀察條帶的亮度及清晰度,以確定合適的反應(yīng)體系。然后利用L16(45)正交試驗(yàn),對(duì)DNA模板濃度、Taq酶含量、dNTP濃度、引物濃度這4個(gè)因素在4個(gè)水平上做進(jìn)一步優(yōu)化。建立了樟子松SSR最佳反應(yīng)體系:25μL的反應(yīng)體系中包含模板DNA50ng,Taq酶1.0U,dNTP0.3mmol/L,引物0.15μmol/L,10×TaqBuffer(含Mg2+)2.5μL。樟子松SSR反應(yīng)體系的優(yōu)化,有助于對(duì)樟子松SSR分子標(biāo)記的研究,為分析樟子松天然群體和人工群體的遺傳結(jié)構(gòu)多樣性,構(gòu)建遺傳圖譜和定位功能基因奠定了基礎(chǔ)。 （共7頁(yè)）