血散薯內(nèi)生真菌的分離鑒定及其抗菌活性研究

摘要： 從血散薯(Stephania dielsiana Y.C.Wu)中尋找活性內(nèi)生真菌,為血散薯植物資源的保護(hù)及活性天然產(chǎn)物的開發(fā)提供依據(jù),對其莖、葉中內(nèi)生真菌進(jìn)行分離鑒定,并研究其抗菌活性。結(jié)果表明,從血散薯莖、葉中共分離得到38株內(nèi)生真菌,其中31株經(jīng)形態(tài)學(xué)結(jié)合分子生物學(xué)的方法鑒定表明,其歸為14個(gè)不同的屬,包括鏈格孢屬(Alternaria)、炭團(tuán)菌屬(Hypoxylon)、枝孢屬(Cladosporium)、莖點(diǎn)霉屬(Phoma)、鐮刀屬(Fusarium)、Stagonosporopsis、Ascomycete、毛殼菌屬(Chaetomium)、擬盤多毛孢屬(Pestalotiopsis)、彎孢霉屬(Curvularia)、短梗霉屬(Aureobasidium)、Annulohypoxylon、小光殼屬(Leptosphaerulina)、刺盤孢屬(Colletotrichum)。其中,優(yōu)勢屬為鏈格孢屬和莖點(diǎn)霉屬。基于前期對峙拮抗預(yù)試驗(yàn)結(jié)果,選取14株內(nèi)生真菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),并測定其對9種植物病原真菌和10種動(dòng)物病原細(xì)菌的抗菌活性。結(jié)果表明,內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)物粗提物對供試病原菌具有不同程度的抑制作用。其中,7株內(nèi)生真菌(葉-8、Y-66、YB-12、J-12、J-34、J-36、J-55)的粗提物對5株或5株以上供試植物病原真菌具有明顯抗菌活性。葉-8、J-12分別對玉米大斑病菌、金橘砂皮病菌表現(xiàn)出最佳的抗菌活性,EC_(50)值分別為0.063 1、0.006 2 mg/mL;J-34對甘藍(lán)黑斑病菌、甘蔗鳳梨病菌表現(xiàn)出最佳的抗菌活性,EC_(50)值分別為0.018 1、0.004 2 mg/mL。10株內(nèi)生真菌的粗提物對金黃色葡萄球菌均具有抑制作用,MIC值介于0.500～10.000 mg/mL,4株內(nèi)生真菌的粗提物對大腸桿菌具有抗菌活性,MIC值介于0.156～4.000 mg/mL。上述結(jié)果表明,血散薯莖葉中存在豐富的內(nèi)生真菌資源,且其次生代謝產(chǎn)物具有廣譜抗菌活性。 （共9頁）